C18色譜柱的詳細分析
2023-03-13
C18色譜柱是反相液相色譜的核心耗材,鍵合相為十八烷基硅烷,通過疏水作用分離非極性至中等極性化合物。
??一、結(jié)構(gòu)特性??
??1.硅膠基質(zhì)??:高純度多孔硅膠;
??2.鍵合相??:單層鍵合密度1.8–3.0μmol/m²;
??3.封端處理??:三甲基氯硅烷封閉游離硅羥基,減少堿性物拖尾;
4??.pH耐受??:標準柱pH2–8,雜化硅膠柱可耐受pH1–12。
二、分離機制與優(yōu)勢??
??疏水作用力主導??:溶質(zhì)烷基鏈與C18鏈間疏水吸附(k值隨溶質(zhì)疏水性↑而↑)
??關(guān)鍵優(yōu)勢??:
耐受有機相(甲醇/乙腈梯度洗脫)
分離多肽、藥物、環(huán)境污染物等復雜樣品
高載樣量(10mg/g填料)
三、??應(yīng)用場景??
1.制藥:小分子藥物、代謝物;
2.生物分析:多肽、蛋白質(zhì)酶解片段;
3.環(huán)境:PAHs、農(nóng)藥殘留;
4.食品:脂溶性維生素、添加劑。
??四、選型關(guān)鍵??
??1.粒徑??:1.8–2.7μm;3–5μm;
2??.孔徑??:小分子選100?,大分子選300?;
??3.特殊需求??:堿性物用二次封端柱,高pH樣品用雜化顆粒柱。
五、使用與維護??
??柱壽命延長技巧??:
流動相過濾(0.22μm膜)
進樣前離心/過濾樣品(防堵篩板)
避免>60℃高溫或強酸強堿條件(pH<2或>10)
??再生流程??:
乙腈沖洗→0.1MH?PO?沖洗→乙腈保存